Verwendung:

Bei der Fixierung werden alle in der Zelle ablaufenden Prozesse unterbrochen, unter möglichst optimaler Erhaltung des Zustandes und der Struktur des Gewebes. Biochemische Prozesse wie Autolyse, Verwesung und Fäulnis werden wirkungsvoll verhindert. Stark wasserhaltige mesenchymale und Gewebe mit Feinstrukturen (z.B. Hoden) lassen sich sehr gut mit Bouin´scher Lösung fixieren. Die Fixierlösung ist ausschließlich für die professionelle Anwendung als in-vitro Diagnostikum im histologischen Labor vorgesehen.

Prinzip:

Die Gewebestücke werden in die Fixierlösung eingetaucht und die Lösung dringt durch Diffusion in das Gewebe ein.
Die Bouin´sche Lösung enthält Pikrinsäure. In Verbindung mit Formalin und Essigsäure zählt sie zu den häufig angewandten Fixiermitteln. Die Fixierlösung wirkt proteinfällend und dringt sehr gut in das Gewebe ein, so dass auch große Gewebestücke gut fixiert werden. Das Gewebe wird gehärtet und konserviert. Schrumpfungen werden durch die Essigsäure gering gehalten. Die Färbbarkeit der Gewebe bleibt sehr gut erhalten.

Verfahren:

Fixierung:

Für die Herstellung von histologischen Präparaten muss die Gewebeprobe direkt nach der Entnahme fixiert werden.

Gewebeproben in Probengefäße geben und mit Bouin´scher Lösung übergießen. Dabei ist die 25fache Volumenmenge des Gewebestücks an Fixiermittel zu verwenden. (für 1x1x1 cm Gewebe = 25 ml Fixierlösung)

Wichtig: Um Möglichkeiten zur Diffusion zu schaffen, angeschnittene Organe, bzw. Organscheiben verwenden, also keine gekapselten Organe. Bessere Diffusion durch schwebende Lagerung und Bewegung.

Beispielprotokoll für 5x5x5 mm Organstücke:

• 12-24h Fixierung mit Bouin´scher Lösung bei Raumtemperatur
• 2-6h Spülen in 70%igen Alkohol bei Raumtemperatur, Alkohol mehrmals wechseln, bis keine Gelbfärbung des Alkohols zu erkennen ist.

Anschließend erfolgt die Dehydration des Gewebes in Alkohol und Xylol, sowie die Einbettung in Paraffin.


Jedes Labor sollte eine eigene Arbeitsanweisung für ein Fixierprotokoll erstellen, die sich an den Gegebenheit des Labors und den jeweils zu bearbeitenden Fragestellungen des Anwenders orientieren.


Weitere mögliche Verwendungen der Komponente wurden im Rahmen der Leistungsbewertung nicht getestet.