Verwendung:

Bei der Fixierung werden alle in der Zelle ablaufenden Prozesse unterbrochen, unter möglichst optimaler Erhaltung des Zustandes und der Struktur des Gewebes. Biochemische Prozesse wie Autolyse, Verwesung und Fäulnis werden wirkungsvoll verhindert. Stark wasserhaltige mesenchymale und Gewebe mit Feinstrukturen (z.B. Hoden) lassen sich sehr gut mit Bouin´scher Lösung fixieren. Die Fixierlösung ist ausschließlich für die professionelle Anwendung als in-vitro Diagnostikum im histologischen Labor vorgesehen.

Prinzip:

Die Bouin Fixierlösung ist ein häufig angewendetes Fixiermittel in der in-vitro-Diagnostik, das aufgrund seiner Komponenten eine effektive Konservierung und Härten von Gewebestücken ermöglicht. Die Lösung dringt durch Diffusion in das Gewebe ein und wirkt proteinfällend. Hierbei binden die Komponenten an Gewebe- oder Zellstrukturen, stabilisieren diese und verhindern so deren Zersetzung oder Veränderung. Die Essigsäure in der Lösung hilft, Schrumpfungen des Gewebes gering zu halten, während die Färbbarkeit der Gewebe erhalten bleibt. Dies ermöglicht eine anschließende Analyse und Untersuchung der fixierten Proben in der in-vitro-Diagnostik.

Verfahren:

Fixierung der Gewebeprobe

1. Entnahme der Gewebeprobe
2. Gewebeprobe in Probengefäß geben
3. Übergießen der Probe mit Bouin'scher Fixierlösung (verwende die 25-fache Volumenmenge des Gewebestücks; z.B. 25 ml Fixierlösung für 1x1x1 cm Gewebe)
4. Nutze angeschnittene Organe oder Organscheiben für bessere Diffusionsmöglichkeiten und verhindere gekapselte Organe
5. Schwebende Lagerung und Bewegung zur Verbesserung der Diffusion

Beispielprotokoll für 5x5x5 mm Organstücke

1. Fixierung mit Bouin'scher Lösung für 12-24 Stunden bei Raumtemperatur
2. Spülen in 70%igem Alkohol für 2-6 Stunden bei Raumtemperatur
3. Alkohol mehrmals wechseln, bis keine Gelbfärbung mehr zu erkennen ist

Dehydration, Xylol-Behandlung und Paraffineinbettung

1. Dehydration des Gewebes in aufsteigenden Alkoholkonzentrationen
2. Xylol-Behandlung zur Entwässerung
3. Einbettung in Paraffin

Eigene Arbeitsanweisung für Fixierprotokoll

Leistung:

BOUIN Fixierlösung ist eine leistungsfähige histologische Fixierlösung zur in-vitro-Diagnostik, bestehend aus angefeuchteter Pikrinsäure, stabilisiertem 37% Formaldehyd und 99% Essigsäure. Sie bietet eine hervorragende Morphologie- und Antigenkonservierung, einschließlich der Erhaltung von Glykoproteinen und nukleinsäurehaltigen Strukturen. Die Lösung ermöglicht eine schnelle Penetration und Fixierung von Gewebeproben, was zu einer besseren Zell- und Kernstrukturerhaltung führt. BOUIN eignet sich optimal zur Untersuchung einer Vielzahl von Gewebetypen und dient der Diagnose einer Reihe von Krankheitsbildern auf zellulärer Ebene.