Färbekit: Hämatoxylin & Eosin (H&E) Schnellfärbung
Die chemische Funktionsweise des Kits basiert auf der Kombination von Hämatoxylin, nach GILL-III, und Eosin in einer 1%igen methanolischen Lösung. Hämatoxylin färbt Zellkerne blau-violett, da es mit den basischen Komponenten der DNA und RNA interagiert. Eosin, ein saurer Farbstoff, färbt cytoplasmatische und extrazelluläre Strukturen pink bis rot, da es mit den basischen Proteinen in Wechselwirkung tritt. Die 0,5%ige Salzsäurelösung dient als schwaches Beizmittel und erleichtert die Bindung von Hämatoxylin an die Zellkerne.
Die besondere Eignung des H&E-Schnellfärbekits liegt in der schnellen und effizienten Färbung von Gewebeschnitten und Zellpräparaten, die eine hohe Kontrastauflösung und klare Strukturdarstellung ermöglicht. Die Verwendung dieses Kits führt zu einer präzisen und differenzierten Darstellung von Zellstrukturen, die für die Beurteilung von histologischen und zytologischen Proben unerlässlich ist.
Art.-Nr.: 13139
Färben von Gewebeproben
Wichtige Hinweise
Verkaufsbeschränkung: keine Privatanwender!
UN-Nummer: siehe Einzelprodukte
Warnhinweise:
Lagerung: siehe Einzelprodukte
Produktinformation
Komponenten dieses Kits:
• Hämatoxilin, nach GILL – III, Artikel-Nr.:11773
• Eosin, 1% methanolisch, Artikel-Nr.:11948
• Salzsäure 0,5 %, Artikel-Nr.:11819
Gebrauchsanweisung / Protokoll / Anwendungsempfehlungen
Verwendung:
Die H&E Färbung ist die häufigste angewendete Färbemethode in der Histologie, als Übersichtsfärbung. Eosinfärbelösung dient nach einer Kernfärbung mit Hämatoxilin zur Gegenfärbung von Proteinen, Bindegewebe, Fasern und Keratin. Zur Färbung werden Abstrichpräparate, Gefrierschnitte, Dünnschichtpräparate, oder Paraffinschnitte verwendet. Mit der Färbung bekommt man einen schnellen Überblick über die Strukturen der Gewebe und die Unterscheidung von normalen oder pathologischen Strukturen ist möglich. Die Färbelösungen sind ausschließlich für die professionelle Anwendung als in-vitro Diagnostikum im histologischen bzw. zytologischen Labor vorgesehen.
Prinzip:
Die Hämatoxylin-Eosin Färbung wird abgekürzt als H&E Färbung. Die Färbung läuft in 2 Färbeschritten ab. Im ersten wird mit Hämatoxylin gefärbt, einen natürlichen Farbstoff aus dem Blauholzbaum (Haematoxylum campechianum). Hämatoxylin färbt alle sauren beziehungsweise basophilen Strukturen blau, insbesondere die Zellkerne. Hämatoxylin ist positiv gelanden und reagiert mit den negativ geladenen Phosphatgruppen der nukleären DNS. Im zweiten Schritt der H&E Färbung werden mit dem sauren Farbstoff Eosin alle basischen Strukturen rosa-rot gefärbt, vor allem Zellplasmaproteine.
Verfahren:
Verwendung: Die Färbung kann progressiv oder regressiv erfolgen. Bei einer progressiven Färbung wird überschüssige Farbe durch kurzes Spülen in Aqua dest. ausgewaschen und der Farbstoff durch Spülen in Leitungswasser zu einem wasserunlöslichen Lack umgewandelt (“Bläuen“). Bei einer regressiven Färbung wird durch längeres Färben (“Überfärben“) und durch anschließendes Spülen in 0,1% Salzsäure-Lösung differenziert. In einem Färbeprotokoll ist die Verwendung eines Hämatoxylinfarbstoffes grundsätzlich als erster Färbeschritt nach der Entparaffinierung oder Entplastung bzw. nach der Wässerung frisch fixierter Proben durchzuführen. Beispiel für eine regessive Hämatoxilin-Eosin-Färbung: (1)Schnitte entparaffinieren (2) Schnitte mit absteigender Alkoholreihe rehydratisieren (3) Aqua dest.15 sec (4) Hämatoxylin, nach GILL–III6 min (5) Spülen in Leitungswasser10 sec (6) Spülen in 0,1%ig HCl-Lösung10 sec (7) Differenzieren und „Bläuen“ in fliessendem Leitungswasser6 min (8) Eosin 1%ig, methanolisch30 sec (9) Spülen in Leitungswasser30 sec (10) Entwässern mit aufsteigender Alkoholreihe (11) Klären mit Xylol, eindecken Jedes Labor sollte eine eigene Arbeitsanweisung für ein Färbeprotokoll erstellen, die sich an den Gegebenheit des Labors und den jeweils zu bearbeitenden Fragestellungen des Anwenders orientieren. Empfehlung: Eventuell auftretende Niederschläge oder Ausfällungen bei häufiger Anwendung können durch Filtration über übliche Faltenfilter beseitigt werden. Weitere mögliche Verwendungen der Komponente wurden im Rahmen der Leistungsbewertung nicht getestet.
Leistung:
Zu erwartenden Ergebnisse: Zellkerne:blau Zytoplasma:rosa-rot Erythrozyten:orange
Gefahren- und Sicherheitshinweise
| Signalwort 2: skull, flamme, acid_red, silhouete |
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Warnhinweise: |