Verwendung:

Salzsäure-Alkohol (3 % / 70 %) findet Verwendung in der in-vitro-Diagnostik, insbesondere in der Histologie. Die Lösung dient primär als Differenzierungsmittel einer (Eisen-)Hämatoxylin-Färbung (regressive Methode). Dabei entfernt sie selektiv überschüssiges Hämatoxylin aus Gewebeschnitten, sodass die Zellkerne sich deutlich violett abzeichnen. Zusätzlich wird diese Mischung zum Entfärben bereits gefärbter Gewebeschichten eingesetzt, wodurch eine vollständige Entfärbung erreicht wird. Dies ermöglicht das erneute Färben der Gewebeschnitte für abweichende diagnostische Untersuchungen, erhöht somit die Flexibilität in der histologischen Analyse und optimiert den diagnostischen Nutzen von Gewebeproben.

Prinzip:

Bei der Hämatoxylin-Färbung wirkt die beschriebene Lösung als Differenzierungsmittel, das dabei hilft, überschüssige oder unspezifisch gebundene Farbstoffe aus den Gewebeproben zu entfernen, um die spezifische Anfärbung bestimmter Zell- und Gewebestrukturen hervorzuheben. Hierfür greift die Salzsäure in der Lösung gezielt die Basen in den Geweben an, was zur Lockerung und teilweisen Entfernung des Farbstoffes führt, während der Alkohol als Lösungsmittel fungiert, das die Farbstoffe aufnimmt und aus den Geweben herauslöst. Diese selektive Entfärbung ermöglicht es, die Strukturen wie Zellkerne und Zellplasmen in unterschiedlichen Farbintensitäten darzustellen und somit eine klarere und präzisere mikroskopische Beurteilung und Diagnose in der Pathologie zu ermöglichen.

Verfahren:

Beispielfärbung: Färbekit: Elastica nach van GIESON 1.: 11070 Xylol 00:05:00 Entparaffinieren 2.: 11070 Xylol 00:05:00 Entparaffinieren 3.: 11470 Ethanol 96%, vergällt 00:02:00 Wässern 4.: 11579 Ethanol 80%, vergällt 00:02:00 Wässern 5.: 12089 Ethanol 70%, vergällt 00:02:00 Wässern 6.: 10354 Resorcin-Fuchsin 00:15:00 Elasticafärbung ggf. auch länger 7.: R00525 Aqua nondest / Leitungswasser 00:05:00 Spülen fließend 8.: 10225 Weigerts Eisenhämatoxylin 00:15:00 Färben der Kerne Stamm A & B - 1 : 1 9.: R00525 Aqua nondest / Leitungswasser 00:08:00 Auswaschen fließend 10.: 17840 Salzsäure Alkohol (3 % / 70 %) 00:00:02 Differenzieren optional Zeiten anpassen: mikr. Kontrolle! 11.: R00337 Aqua dest. 00:00:05 Spülen mikroskop. Kontrolle 12.: 11486 Van GIESON Pikrofuchsin Lösung 00:02:00 Färben 1 - 5 Minuten 13.: R00337 Aqua dest. 00:00:05 Spülen optional 14.: 11470 Ethanol 96%, vergällt 00:02:00 Entwässern 15.: 11470 Ethanol 96%, vergällt 00:02:00 Entwässern 16.: 11365 Isopropanol (2-Propanol) 00:02:00 Entwässern 17.: 11070 Xylol 00:05:00 Entwässern 18.: 11070 Xylol 00:05:00 Entwässern 19.: 12318 Eindeckmittel (xylolhaltig) Eindecken Verwendung: Mehrfach-Übersichtsfärbung zur Differenzierung von Kernen, Fasern, elastischen Fasern und verschiedenen Substanzen der extrazellulären Matrix Ergebnis: Kerne: braun - schwarz Bindegewebe: rot elast. Fasern: schwarz Muskulatur: gelb Zytoplasma: gelb Neuroglia: gelb-orange Schleim, Amyloid, Kolloid, Hyalin: gelb bis rot Wichtiger Hinweis Die hier genannten Zeiten sind nur Empfehlungen. Jedes Labor sollte eigene Färbezeiten evaluieren, die sich an den Gegebenheiten des Labors und der Laborausstattung sowie den jeweils zu bearbeitenden Fragestellungen orientieren. Bitte beachten, dass detaillierte Ergebnisse experimentell validiert werden müssen, und die Verwendung von starken Säuren und Ethanol sorgfältige Handhabung erfordert.

Leistung:

Die Auswirkung einer Kombination aus Salzsäure und Ethanol in der in-vitro-Diagnostik, speziell bei Färbeverfahren, ist sehr spezifisch und variiert je nach Anwendung und Zielstruktur. Ohne spezifische Details zu Testtyp und Zielsubstanz können keine präzisen Ergebnisse vorausgesagt werden. Generell könnte die Mischung für folgende Zwecke eingesetzt werden: - Denaturierung von Proteinen: verbessert die Zugänglichkeit von Bindungsstellen. - Modifikation von Gewebeproben: kann bestimmte Strukturen hervorheben oder maskieren. - Einfluss auf Farbentwicklung bei spezifischen Reagenzien