Verwendung:

Die Warthin-Starry Färbung dient zum histologischen Nachweis von Heliobacter pylori in Gewebeproben mittels Lichtmikroskopie. Verschiedene Modifikationen dieser Färbung finden Anwendung für den gezielten Nachweis anderer Bakterien, wie z.B. Bacillus piliformis und Spirochäten.

Der Nachweis erfolgt i.d.R. in Proben des Oberflächenepithels der Magendrüsen und Magenschleimhaut.

Prinzip:

Die Warthin-Stary-Färbung ist eine klassische Silbernitratfärbung bei der Silbernitrat mit Hilfe eines hydrochinohaltigen Entwicklers zu metallischem Silber reduziert wird. Die Reaktion wird nach einer bestimmten Zeit durch einen Spülschritt gestoppt.

Im Ergebnis wird das Gewebe gelbbraun bis goldbraun gefärbt, während Bakterien schwarz hervorstechen. Zellkerne nehmen eine dunkelbraune Farbe an.

Die Färbung wird durch einen abschließende Fixierungsreaktion in Natriumthiosulfat stabilisiert. Erfolgt dieser Schritt nicht, so bleichen die Schnitte nach einiger Zeit aus.

Verfahren:

Beispiel für eine Warthin-Starry-Färbung:
(keine Metallgefäße verwenden)

(1)Schnitte entparaffinieren
(2) Schnitte mit absteigender
Alkoholreihe rehydratisieren
(3) Leitungswasser2 min
(4) Silbernitrat 1%ig3 min
(5) Spülen in Leitungswasser3 min
(6) Entwicklerlösung4 min
(7) Spülen mit Aqua dest.2 min
(8) Spülen mit Aqua dest.2 min
(9) Natriumthiosulfat-Lösung2 min
(10) Spülen mit Aqua dest.2 min
(11) Entwässern mit aufsteigender
Alkoholreihe
(12) Klären mit Xylol, eindecken

Empfehlung:
Das Silbernitrat (Schritt 4) und die Entwicklerlösung(Schritt 6) können auf 60°C erwärmt werden. Dies kann zu verbesserten Färbeergebnisse führen.

Jedes Labor sollte eine eigene Arbeitsanweisung für ein Färbeprotokoll erstellen, die sich an den Gegebenheit des Labors und den jeweils zu bearbeitenden Fragestellungen des Anwenders orientieren.

Zu beachten ist, dass diese spezielle Färbung sehr viel Sorgfalt und Laborroutine des Durchführenden erfordert.

Leistung:

Erwartete Ergebnisse:

Gewebe:goldbraun
Zellkerne:braun
Baktieren:schwarz