Färbekit: Pikro-Sirusrot für Kollagen II & III Nachweis
Die chemische Funktionsweise dieses Färbekits basiert auf der Kombination von Weigert Stammlösungen A und B, Pikro-Siriusrot und Essigsäure. Weigert Stammlösungen A und B werden im Verhältnis 1:1 kurz vor der Anwendung gemischt und dienen der Zellkernfärbung, während Pikro-Siriusrot spezifisch an kollagene Fasern bindet und sie rot färbt. Essigsäure wird als Lösungsmittel und zur Einstellung des pH-Werts verwendet.
Im Vergleich zu anderen Färbemethoden bietet der Pikro-Siriusrot Färbekit den Vorteil, dass er nicht nur kollagene Fasern (rot) darstellt, sondern auch Muskelgewebe und Zytoplasma (gelb) differenziert und zusätzlich eine Zellkernfärbung ermöglicht. Durch die Untersuchung der Färbung unter polarisiertem Licht können Kollagen Typ I (gelb-orange) und Kollagen Typ III (grünlich) unterschieden werden. Dies ermöglicht eine genauere Analyse der Gewebestruktur und der Zusammensetzung von kollagenem Bindegewebe.
Insgesamt bietet der Pikro-Siriusrot Färbekit eine präzise und spezifische Färbung von Kollagen Typ I und Typ III, eine verbesserte Differenzierung von Muskelgewebe und Zytoplasma, die Möglichkeit, Kollagenfasern unter polarisiertem Licht zu analysieren, sowie eine zusätzliche Zellkernfärbung. Dies trägt zu einem umfassenderen Verständnis der Gewebearchitektur und möglichen pathologischen Veränderungen bei.
Art.-Nr.: 13425
Färben von Gewebeproben
Wichtige Hinweise
Verkaufsbeschränkung: keine Privatanwender!
UN-Nummer: siehe Einzelprodukte
Warnhinweise:
Lagerung: siehe Einzelprodukte
Produktinformation
Komponenten dieses Kits:
• Weigert Stammlösung A, Artikel-Nr.:10225A
• Weigert Stammlösung B, Artikel-Nr.:10225B
• Pikro-Siriusrot, Artikel-Nr.:13422
• Essigsäure ~ 30 %ig, Artikel-Nr.:13428
• Essigsäure ~ 30 %ig, Artikel-Nr.:13428
Gebrauchsanweisung / Protokoll / Anwendungsempfehlungen
Verwendung:
Bei dem Färbekit Pikro-Siriusrot für Kollagen handelt es sich um eine Spezialfärbung zur Darstellung kollagener Fasern (rot) in Binde- und Stützgewebe mit Differenzierung von Muskelgewebe und Zytoplasma (gelb) und Zellkernen (grau bis schwarz). Im polarisierten Licht lässt diese Färbung eine Unterscheidung von Kollagen Typ 1 (gelb-orange) und Kollagen Typ 3 (grünlich) zu. Zur Färbung werden Gefrierschnitte, Dünnschnitt-Präparate, und Paraffinschnitte verwendet. Die Färbelösung ist ausschließlich für die professionelle Anwendung als in-vitro Diagnostikum im histologischen Labor vorgesehen.
Prinzip:
Grundlage der Hämalaun-Färbung ist zunächst eine Oxidation des Hämatoxylin zu Hämatein. Durch Zugabe von Metallsalzen (EisenIII-chlorid) kommt es zu einer Komplexbildung der Metallionen mit dem Hämatein. Es entsteht ein Hämatoxylinlack, der stark positiv geladen ist. Gefärbt wird in saurer Lösung. Die Kernfärbung mit Weigert Eisenhämatoxylin ist besonders stabil bei Gegenfärbungen mit sauren Farbstofflösungen. Siriusrot ist ein Azofarbstoff, der sich durch seine hydrophobe Eigenschaften an Kollagene bindet. Durch die große Molekülstruktur werden andere Gewebe-komponenten nicht abgefärbt. Aufgrund seiner Doppelbrechung können die Kollagene im polarisierten Licht unterschieden werden.
Verfahren:
Beispiel für Pikro-Siriusrot für Kollagen I & III Nachweis (1)Schnitte entparaffinieren (2) Schnitte mit absteigender Alkoholreihe rehydratisieren (3)Aqua nondest.(fliessend wässern) 4 min (4) Weigert Eisenämatoxylin (Gebrauchslsg.) 15 min (5) Aqua dest. 30 sec (6) Aqua nondest.(fliessend wässern) 8 min (7) Aqua dest. 1 min (8) Pikro-Siriusrot 60 min (9) Essigsäure 30% 1 min (10) Essigsäure 30% 1 min (11) Entwässern mit aufsteigender Alkoholreihe (12) Klären mit Xylol und abschließend Eindecken Die Kernfärbung mit Weigert Eisenhämatoxylin ist abhängig dem Härtegrad des Leitungswassers und dem Oxidationszustands des Hämatoxylin. Das Färbeergebnis kann von blau-schwarz bis braun variieren. Jedes Labor sollte eine eigene Arbeitsanweisung für ein Färbeprotokoll erstellen, die sich an den Gegebenheit des Labors und den jeweils zu bearbeitenden Fragestellungen des Anwenders orientieren. Weitere mögliche Verwendungen der Komponente wurden im Rahmen der Leistungsbewertung nicht getestet. Empfehlung: Eventuell auftretende Niederschläge oder Ausfällungen bei häufiger Anwendung können durch Filtration über übliche Faltenfilter beseitigt werden.
Leistung:
Zellkerne:grauschwarz bis braun Kollagen: rot Muskulatur und Zytoplasma: gelb In polarisiertem Licht: Kollagen I: rotgelb Kollagen III:grün
Gefahren- und Sicherheitshinweise
Signalwort 1: Gefahr |
Signalwort 2: flamme, acid_red, exclam, |
Warnhinweise: |