Färbekit: Alcianblau-PAS
Die besondere Eignung dieses Kits liegt in der differenzierten Darstellung von Gewebebestandteilen. Es ermöglicht eine differenzierte Analyse von Gewebeschnitten, insbesondere in der Diagnostik von Erkrankungen, die mit einer veränderten Zusammensetzung oder Struktur des Bindegewebes einhergehen.
Die chemische Zusammensetzung des Kits umfasst Alcianblau, Perjodsäure, Schiff'sches Reagenz und Hämatoxylin. Alcianblau bindet an saure Mucosubstanzen und gibt ihnen eine blaue Farbe. Die Perjodsäure oxidiert neutrale Polysaccharide, die anschließend mit dem Schiff'schen Reagenz interagieren und rot gefärbt werden. Hämatoxylin wird als Gegenfärbung eingesetzt und erzeugt den rosafarbenen Hintergrund.
Die Funktionsweise des Kits basiert auf der spezifischen chemischen Wechselwirkung der enthaltenen Reagenzien mit den Zielstrukturen im Gewebe. Diese spezifische Bindung ermöglicht die differenzierte Färbung und damit die visuelle Unterscheidung der verschiedenen Gewebebestandteile.
Art.-Nr.: 11388
Nachweis von Mucopolysacchariden
Wichtige Hinweise
UN-Nummer: siehe Einzelprodukte
Lagerung: siehe Einzelprodukte
Produktinformation
Komponenten dieses Kits:
• Alcianblau 1 % (pH 2,5 in Essigsäure), Artikel-Nr.:12696
• Perjodsäure 1,0 %ig, Artikel-Nr.:11415
• Schiff'sches Reagenz, Artikel-Nr.:11686
• Hämatoxilin, nach GILL – III, Artikel-Nr.:11773
Gebrauchsanweisung / Protokoll / Anwendungsempfehlungen
Verwendung:
Bei der Alcianblau-PAS Färbung handelt es sich um eine Kombinationsfärbung, bei der sich mittels der PAS Reaktion und der Reaktion des Alcianblau diverse Kohlenhydrate abhängig vom pH und der Elektrolytkonzentration darstellen lassen. Die PAS-Färbung wird vor der Färbung mit Alcianblau durchgeführt, um neutrale Mucine, neutrale Glykoproteine und Glykogen zu färben. Die Alcianblau-PAS Färbung ist insbesondere in der Diagnostik von Lungentumoren und Lungenmetastasen, sowie bei Erkrankungen des Gastrointestintraktes von Bedeutung, wird aber auch bei anderen Karzinomen und Krankheitsbildern eingesetzt.
Prinzip:
Alcianblau wird in der Histologie verwendet, um saure Mukosubstanzen (saure Mucine und sulfatierte Glykosaminoglykane wie Hyaluronsäure oder Chondroitinsulfat) bei niedrigem pH-Wert (1,0 bis 2,5) selektiv anzufärben. Je nach pH-Wert der Färbelösung können spezifische Mucine nachgewiesen werden. Eine weitere Methode der selektiven Darstellung, ist die Variation der Elektrolytkonzentration. Mit steigender Ionenstärke wird eine Färbung mit Alcianblau verhindert, wodurch eine Differenzierung unterschiedlich stark sulfatierter Mucopolysaccharide sowie Heparine, Heparinsulfate und Keratinsulfate möglich ist.
Verfahren:
Beispiel für einer PAS-Färbung: (1)Schnitte entparaffinieren (2) Schnitte mit absteigender Alkoholreihe rehydratisieren (3)Aqua dest.2 min (4) Alcianblau 1% (pH 2,5 in Essigsäure)5 min (5) Fließend Wässern 3 min (6) Aqua dest. 10 sec (7) Perjodsäure 1%20 min (8) Fließend Wässern3 min (9) Aqua dest. 10 sec (10)Schiffsches Reagenz20 min (11) Fließend Wässern (alternativ Sulfitwasser) 3 min (12) Aqua dest. 10 sec (13) Hämatoxylin nach Gill-III1 min (14) Fließend Wässern3 min (15) Entwässern mit aufsteigender Alkoholreihe (16) Klären mit Xylol, eindecken Die Kernfärbung mit Hämatoxylin ist abhängig dem Härtegrad des Leitungswassers und dem Oxidationszustands des Hämatoxylin. Das Färbeergebnis kann von blau-schwarz bis braun variieren. Jedes Labor sollte eine eigene Arbeitsanweisung für ein Färbeprotokoll erstellen, die sich an den Gegebenheit des Labors und den jeweils zu bearbeitenden Fragestellungen des Anwenders orientieren. Weitere mögliche Verwendungen der Komponente wurden im Rahmen der Leistungsbewertung nicht getestet. Empfehlung: Eventuell auftretende Niederschläge oder Ausfällungen bei häufiger Anwendung können durch Filtration über übliche Faltenfilter beseitigt werden.
Leistung:
Erwartete Ergebnisse: PAS-positive saure Mucosubstanzen:rosa-purpur PAS-negative saure Mucosubstanzen: leuchtend blau Kerne:blau Polysaccharide:rot Neutrale Mukosubstanzen: rot