Eosin 0,5 %, methanolisch

Verwendung:

Eosinfärbelösung dient nach einer Kernfärbung mit Hämatoxilin zur Gegenfärbung von Proteinen, Bindegewebe, Fasern und Keratin. Zur Färbung werden Abstrichpräparate, Gefrierschnitte, Dünnschicht-präparate, oder Paraffinschnitte verwendet. Die Färbelösung ist ausschließlich für die professionelle Anwendung als in-vitro Diagnostikum im histologischen bzw. zytologischen Labor vorgesehen.
Die Färbelösung Eosin 0,5%ig, methanolisch kann einzeln oder in Kombination mit Hämatoxilin, (z. B. Artikel-Nr.: 10231) in der H&E-Färbung angewendet werden.

Prinzip:

Eosin (Tetrabrom-Flourescein-Natrium) wird regressiv gefärbt, es wird also erst überfärbt und anschliessend differenziert. Das in saurer Lösung vorliegende Eosin färbt Cytoplasma und extracytoplasmatische Strukturen (Kollagen). Durch Abgabe von H+-Ionen der sauren Lösung bekommt das Cytoplasma eine positive Ladung. Negativ geladenes Eosin kann an das Cytoplasma binden. Eine Verstärkung der Eosinfärbung kann man erreichen, indem das Gewebe mit Säure vorbehandelt wird oder der Färbelösung einige Tropfen Essigsäure zugegeben werden. Es kommt zu einer vermehrten H+-Ionenanlagerung an den Aminogruppen der Proteine. Üblicherweise wird ein pH-Wert zwischen 4 und 6 eingestellt. Der pH-Wert der Lösung beeinflusst den Farbton. Bei alkohol. Lösungen kann der gleiche Effekt erzielt werden (jedoch ohne die Möglichkeit einen pH-Wert anzugeben), indem definierte, empirisch ermittelte Mengen von Essigsäure der alkohol. Lösung hinzugegeben werden, um das gewünschte Färbeergebnis zu erzielen.

Verfahren:

Beispiel für eine Hämatoxilin-Eosin-Färbung:

(1)Schnitte entparaffinieren
(2) Schnitte mit absteigender
Alkoholreihe rehydratisieren
(3) Aqua dest. 3 min
(4) Hämatoxylin, sauer nach Mayer(*optional) 5 min
(5) Fliessend Wässern in Leitungswasser 5 min
(6) Eosin 0,5%ig, methanolisch 5 min
(7) Fliessend Wässern in Leitungswasser 4 min
(8) Entwässern mit aufsteigender
Alkoholreihe
(9) Klären mit Xylol, eindecken

*optional
Zur Kernfärbung können ausser dem angegebenen Hämatoxylin weitere angewendet werden, wie z.B.:

Hämatoxylin 5%igArtikel-Nr.: 11217
Hämatoxylin, nach GILL–IArtikel-Nr.: 10216
Hämatoxylin, nach GILL–IIArtikel-Nr.: 11769
Hämatoxylin, nach GILL–IIIArtikel-Nr.: 11773
Hämatoxylin nach MassonArtikel-Nr.: 12388




Jedes Labor sollte eine eigene Arbeitsanweisung für ein Färbeprotokoll erstellen, die sich an den Gegebenheit des Labors und den jeweils zu bearbeitenden Fragestellungen des Anwenders orientieren.


Empfehlung:
Eventuell auftretende Niederschläge oder Ausfällungen bei häufiger Anwendung können durch Filtration über übliche Faltenfilter beseitigt werden.



Weitere mögliche Verwendungen der Komponente wurden im Rahmen der Leistungsbewertung nicht getestet.

Leistung:

Zu erwartenden Ergebnisse:

Zytoplasma:rosa-rot
Erythrozyten:orange

Optional:
Kernfärbung mit Hämatoxylin, sauer nach Mayer
(Artikel-Nr.: 10231)

Zellkerne:blau/violett