Verwendung:

LÖFFLERs Methylenblau ist ein basischer Farbstoff zur Darstellung von Zellkernen und Mikroorganismen. Es dient als schnelle Übersichtsfärbung in der Histologie, Zytologie und Bakteriologie. Spezifische Anwendungsbereiche sind: Bakteriologie: Nachweis von Bakterien, insbesondere Corynebacterium diphtheriae, sowie Übersichtsfärbungen von Bakterienausstrichen. Histologie: Kerndarstellung in Gewebeschnitten, Färbung der grauen Substanz im Nervengewebe, Kontrastfärbung bei Spezialfärbungen (z. B. Ziehl-Neelsen, Gram). Zytologie: Schnellfärbung von Ausstrichen (z. B. Spermien, Vaginal-/Zervixabstrichen, Blutausstrichen als Vorstufe zur Giemsa-Färbung). Molekularbiologie: Sichtbarmachung von Nukleinsäuren in Gelen als ungefährlichere, aber weniger empfindliche Alternative zu Ethidiumbromid oder SYBR-Green.

Prinzip:

Methylenblau ist ein basischer Chromophor, der bevorzugt an negativ geladene Strukturen bindet (DNA, RNA, Nukleoproteine). Dadurch werden Zellkerne, Nukleoli und bestimmte Mikroorganismen intensiv blau angefärbt. Die alkalische Einstellung der LÖFFLER-Lösung verstärkt den Kontrast und erleichtert die mikroskopische Beurteilung.

Verfahren:

Vorbereitung Sicherstellen, dass alle Materialien, wie Objektträger und Mikroskop, gereinigt und einsatzbereit sind. Überprüfung der Methylenblau-Lösung auf Klarheit und eventuelle Ausfällungen. Vor Gebrauch gut schütteln. Färben Zell- oder Gewebeproben auf einem Objektträger verteilen. Für die Kernfärbung der Proben, Methylenblau auf den Objektträger tropfen und die Proben damit bedecken. Die Einwirkzeit sollte zwischen 1-5 Minuten liegen, abhängig vom Zelltyp und von der gewünschten Färbungsintensität. Nach der Färbezeit die überschüssige Färbung mit destilliertem Wasser abspülen. Eindecken Nach dem Abspülen der Färbung Objektträger leicht trocken tupfen. Auftragen eines Eindeckmediums, um die Probe für die mikroskopische Betrachtung zu fixieren. Auflegen eines Deckgläschens vorsichtig, um Luftblasen zu vermeiden. Dokumentation des Färbeergebnisses und Reinigung der Arbeitsfläche. Die hier genannten Zeiten sind nur Empfehlungen. Jedes Labor sollte eigene Färbezeiten evaluieren, die sich an den Gegebenheiten des Labores und der Laborausstattung und den jeweils zu bearbeitenden Fragestellungen orientieren.

Leistung:

Schnelle Kernfärbung, Darstellung bakterieller Strukturen, Übersichtsfärbung von Gewebe- und Zellausstrichen, Kontrast-/Gegenfärbung. - Färbt bakterielle Zellstrukturen wie Granula und Granulocyten zur leichteren Identifizierung. - Wird oft verwendet zur Unterscheidung von Mikroorganismen, speziell in der Bakteriologie. - Kann genutzt werden, um bestimmte Zellbereiche wie Zellkerne hervorzuheben. - Ermöglicht eine bessere Sichtbarmachung pathogener Zellen in klinischen Proben. - Wird in der Histologie zum Färben von Gewebeschnitten eingesetzt. Bitte beachten Sie, dass spezifische Ergebnisse je nach Anwendung und Präparationsmethode variieren können.