Verwendung:

Bei dem Färbekit Trichrom für elastische Fasern handelt es sich um eine Trichromfärbung zur differenzierten Bindegewebsdarstellung. Das Bindegewebe wird in kontrastierenden Farben zur Umgebung (Cytoplasma, Muskelfasern) angefärbt. Zur Färbung werden Gefrierschnitte, Dünnschicht-Präparate, und Paraffinschnitte verwendet. Die Lösungen sind ausschließlich für die professionelle Anwendung im histologischen Labor vorgesehen.

Prinzip:

Bei der Trichromfärbungen werden mehrere Gewebekomponenten in einer Färbung gleichzeitig (simultan) oder durch nachfolgende Farblösungen (succedan) angefärbt. Grundlage bei der Masson Goldner Trichromfärbung ist die unterschiedliche Molekülgrösse der Farbstoffe.(Dispersität) Nach der Kernfärbung mit Weigert Eisenhämatoxylin werden verschiedene disperse Farbstoffe angewendet. Die feindisperse Phase (Ponceau, Orange G) dringt schnell in alle Strukturen ein, die grobdisperse Phase (Säurefuchsin, Lichtgrün) dringt langsamer ein und färbt zunächst nur die groben Strukturen an. Dabei wird die feindisperse Phase überfärbt. Man unterbricht die Färbung, bevor die grobdisperse Phase alle Strukturen durchdrungen hat, da es sonst zu einer Überfärbung kommt.

Verfahren:

Beispiel für eine Masson Goldner Trichromfärbung: (1)Schnitte entparaffinieren (2) Schnitte mit absteigender Alkoholreihe rehydratisieren (3)Weigert Eisenämatoxylin (Gebrauchslsg.) 15 min (4) Aqua dest. 15 sec (5) Fliessend Wässern8 min (6) Säurefuchsin-Ponceau-Azophloxin4 min (7) Essigsäure 1%ig30 sec (8) Phosphormolybdänsäure Orange G 30 min (9) Essigsäure 1%ig30 sec (10)Lichtgrün-Goldner III 6 min (11) Essigsäure 1%ig 2 min (12) Fliessend Wässern 1 min (8) Entwässern mit aufsteigender Alkoholreihe (9) Klären mit Xylol, eindecken Die Kernfärbung mit Weigert Eisenhämatoxylin ist abhängig dem Härtegrad des Leitungswassers und dem Oxidationszustands des Hämatoxylin. Das Färbeergebnis kann von blau-schwarz bis braun variieren. Jedes Labor sollte eine eigene Arbeitsanweisung für ein Färbeprotokoll erstellen, die sich an den Gegebenheit des Labors und den jeweils zu bearbeitenden Fragestellungen des Anwenders orientieren. Für die Einzelverwendung der Komponenten dieses Kits möchten wir Sie auf die gesonderten Beipackzettel verweisen. Weitere mögliche Verwendungen der Komponente wurden im Rahmen der Leistungsbewertung nicht getestet. Empfehlung: Eventuell auftretende Niederschläge oder Ausfällungen bei häufiger Anwendung können durch Filtration über übliche Faltenfilter beseitigt werden.

Leistung:

Erwartete Ergebnisse: Zellkerne:blau-schwarz bis braun Zytoplasma:rot Muskulatur:ziegelrot Kollagenes Bindegewebe:grün Erythrozyten:orangerot